Vol_13,2006,No.5 食品科技 酶在大豆蛋白加工领域的应用进展 赵振锋,段钢 丹尼斯克杰能科生物工程有限公司 (无锡214035) 摘 要:以改性分离蛋白、大豆多肽、植物水解蛋白(HVP)为例,介绍了酶制剂在大豆蛋白加 工领域的应用情况,并对未来的发展情况进行了展望。 关键词:酶;大豆蛋白;分离蛋白;多肽;植物水解蛋白 中图分类号:TS201.2 5 文献标识码:B 文章编号:1672—5026(2006)05—0018—04 Progress in applications of enzyme in soy protein processing field Zhao Zhenfeng。Duan Gang Danisco Genencor B 0P g PP,. g Co.。Ltd.(Wuxi 214035) Abstract:The applications of enzyme in soy protein processing industry are introduced by the examples of protein isolated。soy polypeptide and hydrolyzed vegetable protein(HVP).Its devel— opment is prospected. Key words:enzyme;soy protein;protein isolated;polypeptide;hydrolyzed vegetable protein 大豆蛋白是当前食品加工行业中应用量最大、 应用范围最广的植物蛋白产品,在食品加工业中占 有重要的地位。 分离蛋白是大豆的深加工产品之一,其市场扩 展很快,年增长率在15 9/6以上。目前,国内有数十 家分离蛋白厂即将建成或投产,并且大多年产量在 万吨以上。 酶是一种生物催化剂,随着基因工程的发展,酶 技术也发生着革命性的变化,成为推动食品工业快 速发展的“催化剂”。利用酶对大豆蛋白质进行改性 酶制剂的发展,为蛋白产品功能的改进开辟了 新的发展空间。根据市场需求,通过不同蛋白酶的 选择、工艺条件和水解程度的调整,可开发生产出多 种具有不同功能特性的产品。 1.1.1注射型分离蛋白 注射型分离蛋白主要用 于整块肉制品的注射用盐渍液中,该类产品要求具 有较低的黏度,同时,要求将凝胶性控制在一定范围 内。 处理,可以生产多种不同性能的蛋白产品,使其应用 范围得以扩展。 用于大豆蛋白生产和研究的酶主要包括蛋白质 水解酶、谷氨酰胺转氨酶、纤维素酶、果胶酶[1 等,目 前商业上常用的为蛋白质水解酶,即蛋白酶。蛋白 酶种类很多,按其来源可分为动物蛋白酶、植物蛋白 酶和微生物蛋白酶;按其pH应用范围可分为中性 蛋白酶、碱性蛋白酶和酸性蛋白酶。 黏度大小通常主要由蛋白质分子量决定,分子 量越大,黏度就越大。80 9/6大豆蛋白的分子量在 1 酶技术在大豆蛋白中的应用 1.1改性分离蛋白 170万以上,具有较高的黏度。如果直接应用于肉 制品的注射腌渍液中,会堵塞针头,造成应用上的困 难。对分离蛋白进行有限酶解处理,可降低其分子 量,从而降低其黏度。 修回日期:2006—07—18 收稿日期:2006—06—13 大豆蛋白具有热凝胶性能,分离蛋白的热凝胶 作者简介:赵振锋,男,1974年出生,硕士研究生.主要从事 酶制剂在食品行业中应用的研究工作。 18 性能随水解度的提高而降低。分离蛋白保持一定的 维普资讯 http://www.cqvip.com
鞭食与食品工业 一z n d Food Ind“str 凝胶性,可以提高最终肉制品产品的弹性和切片质 量、降低其蒸煮损耗。 1.1.2 乳制品和饮料用分离蛋白 普通的乳制品 中蛋白含量比较低,在其中添加分离蛋白具有良好 的市场前景。同时,从营养学角度讲,大豆蛋白含有 各种人体必需氨基酸,是一种完全蛋白质。1999年 美国FDA已经正式认可大豆蛋白的保健功能,对 其降胆固醇功效进行了认定,确认它是一种良好的 保健原料。 国外的许多配方乳制品和保健品都含有分离蛋 白,乳制品用分离蛋白市场增长很快。1999年,在 乳品和饮料中大豆分离蛋白的需求量为5 000 t,而 2002年,需求量已增长到40 000 t。 用蛋白酶对分离蛋白进行水解,一方面可以使 其溶解性、黏度等性能符合乳制品、固体饮料类产品 的要求。如在乳制品中要求所添加的分离蛋白黏度 低,无异昧,溶解度高,不溶性固体含量低于一定指 标;另一方面,酶解分离蛋白具有较高营养价值,除 能提高消化率外,还具有抗氧化、清除体内自由基的 功能 。 用酶法生产乳制品用分离蛋白,一方面需提高 其溶解度,控制其黏度的降低;另一方面需防止苦昧 产生,一般需控制酶解水解度(DH)在10%~20 9/6。 而对于固体饮料用分离蛋白产品,还要求其具有良 好的冲调性能,因此,需要对蛋白进行速溶化处理, 如表面喷涂磷脂、附聚造粒等。 1.1.3 其他功能型分离蛋白产品 分离蛋白在食 品中能得到广泛应用,主要在于其良好的功能特性。 在酶解过程中,分离蛋白的溶解性、黏度、起泡性、乳 化型、凝胶性、持水性、持油性等特性都会产生变化。 上述两种分离蛋白是目前市场上应用较广泛的酶解 蛋白种类。根据市场需求,对分离蛋白进行有限酶 解,选择不同种类的酶,采用不同的酶解条件,可以 开发出不同功能特性的产品,如酸溶性分离蛋白、高 起泡型分离蛋白、高乳化型分离蛋白等。 目前,对改善功能型分离蛋白起泡性能和乳化 性能的研究较多。研究证明,在制备具有高乳化能 力或高起泡能力的分离蛋白时,DH最高只能控制 在5 9/6左右。当DH超过5 时,乳化能力和起泡能 力都会大幅降低。同时,研究 也证明,地衣芽孢杆 菌发酵生产的碱性蛋白酶在改善功能性方面具有较 好效果,原因可能是用该酶进行水解时,能产生较高 含量的非终端疏水性氨基酸,从而可提高泡沫稳定 Vo1.13,2006,No.5 性和乳化稳定性。 酸溶性分离蛋白(ISSPH)是一种新的功能型分 离蛋白产品,是指在分离蛋白等电点处仍然能够溶 解的蛋白水解产物。这种蛋白可用于酸性饮料中, 具有广阔的市场发展空间。生产ISSPH时,相对其 他功能型产品而言,分离蛋白需要较高的水解度;同 时,如应用在饮料行业中,对苦昧的控制要求也较 高。 1.2大豆多肽 由多个氨基酸缩合而成的化合物称为多肽,多 肽和蛋白质都是以a一氨基酸为组成单位的,它们 之间没有严格的区分,一般是将相对分子量在 10 000以下的统称为多肽。大豆多肽是以大豆、豆 粕或大豆蛋白为主要原料,用酶或生物方法水解得 到的一种蛋白质水解产物,做为一种新型的保健品 原料,大豆多肽近年来也成为市场上的消费热点之 一。据研究,具有生物活性的多肽,其分子量通常在 1 000以下。 多肽与大豆蛋白相比,具有低过敏的特点,且由 于其分子量小,可被人体直接吸收;另外,多肽还具 有降胆固醇、降血压、抗氧化、能使人迅速恢复体力 并提高耐力等保健功能『4]。同时,大豆多肽还具有 高溶解度、酸溶性、低渗透压,高稳定性等应用特性。 多肽生产的关键在于酶解的控制和后期处理。 酶解的控制一方面包括酶的种类的选择,以保证酶 解彻底均匀,同时尽量减少苦昧物质的产生。同时, 选择不同种类的酶和反应条件,酶解产品也会呈现 不同的生物活性 ;另一方面,应控制大豆多肽的分 子量于一定范围,分子量的分布情况,决定了产品的 品质和价格高低。目前,后期处理通常采用膜技术 或溶剂方法进行处理,使多肽的分子量分布更加均 匀,一些高质量的多肽产品还需要进行脱苦、脱盐等 工艺。 对大豆多肽的研究比较多,张国胜等[5 对比了 不同种蛋白酶(中性蛋白酶、外肽酶、碱性蛋白酶和 复合蛋白酶)制备多肽的抗高血压活性。研究表明, 水解度和ACE(血管紧张素转换酶)的抑制无显著 关系,同时研究也表明,AS1389中性蛋白酶水解产 物的活性最高。 吴建中等[6 用复合蛋白酶对分离蛋白进行酶解 处理,研究表明,复合蛋白酶对分离蛋白的水解过程 是个不均匀的过程,尽管经过了长时间的水解,DH 可达到11.6 ,但水解液中仍含有大量的蛋白大分 1 9 维普资讯 http://www.cqvip.com
食品科技 子。刘光辉 用碱性蛋白酶制备多肽产品,水解度 达14.5 ,产品中分子量小于1 000的多肽含量约 为72.1 。研究者们 ]通过不同种酶的组合,证 明了对蛋白酶复合使用,可以提高水解度、降低苦 味。刘通讯l1∞等人先用碱性蛋白酶和中性蛋白酶 复合对分离蛋白进行水解,然后用米曲霉发酵生产 的肽酶进行进一步水解,证明分步水解效果好于单 步水解,产品多肽含量相对单步水解时约高12 。 目前,国内已有多家大豆多肽生产厂家,如武汉 天天好生物制品有限公司、山东中食都庆生物技术 股份有限公司、哈尔滨乐能生物股份有限公司、哈高 科大豆食品有限责任有限公司等,产品价格从 2.5万元/t至80万元/t不等,产品的主要差别在于 产品中多肽组分含量和杂质含量,在当前国家行业 标准中,大豆多肽粉的多肽含量有55 9/5、7O 9/6、80 9/5 3种规格。 1.3植物水解蛋白(HVP)的生产 植物水解蛋白在加工调味食品中广泛用作调味 品和配料,大豆豆粕具有高蛋白含量、来源广泛等特 点,是生产HVP的主要原料之一。用豆粕生产 HVP的工艺主要有酶法和酸法两种。 酸法生产植物水解蛋白的条件是高酸高温,蛋 白水解的同时会产生各种氯丙醇,此类物质具有一 定的毒性,对人体的肝、肾和神经系统都有损害,有 些氯丙醇成分还具有很强的致癌性。而用酶法生产 HVP条件温和,蛋白质被水解为多肽和氨基酸等物 质,产品具有很高的营养价值和功能特性;另外,氨 基酸未被破坏,构型未发生改变,且水解度易于控 制,这就决定了酶法生产是未来植物水解蛋白发展 的方向【 。 用酶法生产水解蛋白目前仍存在的一些问题: ①水解度问题。酶法生产水解蛋白,由于蛋白 酶作为生物催化剂,具有一定的专一性,而植物蛋白 本身存在着一些氨基酸肽键,对酶的水解具有一定 的抗性,如大豆蛋白中的脯氨酸残基和甘氨酸残基 等 ,因此,相对于酸法水解,酶法水解的水解度较 低L1 。一般条件下,酸法可使蛋白质几乎完全水 解,氨基酸态氮占总氮的90 9/6左右;而对于酶法水 解,该值只占20 9/5~60 9/5之间。 ②呈味反应的程度。呈味物质的产生是一个复 杂过程,除蛋白水解产生的呈味物质(包括一些氨基 酸和一些小分子的肽类)外,还有美拉德反应及其他 呈味反应的作用。酶法生产HVP,一方面受限于低 2O 赵振锋等:酶在大豆蛋白加工领域的应用进展 水解度的影响,呈味肽和呈味氨基酸含量相对不足; 另一方面,由于条件温和,其作用过程相对单一,主 要是蛋白质的降解反应,呈味反应较少。因此,产品 相对于酸法水解蛋白而言,风味显得不够厚重。 ③苦味问题。在调味品生产中应用的水解蛋 白,苦味物质除少量是氨基酸外,主要是分子量为 1 000 ̄6 000的肽类,酶法水解水解度较低,苦味问 题更加突出。 上述问题的存在,制约着酶法水解在HVP生 产中的应用。目前,国内植物水解蛋白仍以酸法水 解为主。针对这些问题,科研工作者也做了许多研 究。 Harem等 人研究了蛋白酶对谷朊粉的水解, 在酶解处理前,用弱酸在95℃下进行1h的脱酰胺 处理,然后再用米曲霉蛋白酶进行水解,水解度可达 50 ~70 ;Nielsen等 ]人研究了对大豆分离蛋 白的深层水解,复合使用外肽酶和碱性蛋白酶对蛋 白液进行处理,水解度可达60 ~70 ;Aaslyn ”] 等人用碱性蛋白酶和外肽酶对脱脂大豆粕进行了水 解试验,其水解度在1Oh时超过了50 9/6;Byun等It2] 研究证明了酪蛋白、大豆蛋白、谷朊粉中甘氨酸和脯 氨酸对酶解有抗性,同时,用米曲霉中克隆生产出两 种特异性氨肽酶,用这两种酶和碱性蛋白酶复合使 用,可使酪蛋白、大豆蛋白、谷朊粉的水解度分别达 到68.5 、71.5 、64 。 通过后处理工艺或以酶解植物水解蛋白 (E—HVP)为基料来合成热加工食品香料(process flavor),是提高酶解植物蛋白风味的有效途径。 Fischer等 人对酶法生产HVP的风味问题进行 了研究,在pH5条件下,对酶解液(包括不溶组分) 进行加热处理,该处理对其风味具有增强作用,同时 没有苦味产生;wu等[1 用响应面分析的方法,对用 E—HVP为基料生产热加工食品香料的工艺进行 了研究,结果表明,肉类风味香料的优化反应条件 为:10 的E—HVP,PH6~7.5,温度90~99℃,反 应时间1~2 h,半胱氨酸的添加量在4.5×10~~ 6.01×10~mol/L,同时,核糖的添加对风味的形成 没有影响;武彦文等 1]也做了类似的研究,得到的 优化条件为:添加6 9/5葡萄糖、0.8 9/6 L一半胱氨酸 和0.4 9/6 DL一蛋氨酸,在115℃下反应1 h,产品呈 现出强烈而协调的肉类风味。 Aaslyng等人在对大豆粕的水解试验中发现, 水解物风味的形成、水解度的提高都主要在反应的 维普资讯 http://www.cqvip.com
辕食与食品工业Cereal and Food Industry 前10 h内发生,反应10 h后风味和水解度变化都 很小 ;同时,无论是在氨基酸成分还是风味变化 方面,酸法水解常用的后熟工艺对酶解蛋白的影响 都很小 。.另外,美国目前采用的酸酶法也是解决 风味问题的良好途径,即先用中性蛋白酶水解蛋白 (40 ̄45℃,pH6.5~7.0),然后在缓和的条件下进 行酸水解,在保证口味的同时,尽可能降低氯丙醇含 量。随着技术的发展,酶法水解在HVP生产中将 占有越来越重要的地位。 1.4其他大豆蛋白 除大豆分离蛋白、大豆多肽、水解植物蛋白外, 大豆浓缩蛋白也是重要的一种大豆深加工产品。同 分离蛋白的改性类似,利用酶的作用,也可以提高产 品功能性,开发出多种功能产品。 以上介绍的都是大豆蛋白的水解反应,除此之 外,还有大豆蛋白的合成类蛋白反应和蛋白质交联 反应。同时,也有研究表明,在大豆分离蛋白生产过 程中,添加纤维素酶和果胶酶,可以用于提高产品蛋 白质含量和回收率[1],但由于成本及效果等方面的 原因,这些酶应用于大豆蛋白商品化生产的例子还 比较少见。随着市场化和研究的进一步发展,酶制 剂用于大豆蛋白的种类和范围也会更加广泛 2 酶解蛋白的苦味问题 对酪蛋白、马铃薯蛋白、大豆蛋白、大米蛋白和 小麦蛋白进行酶解,都会出现苦味问题。酶解蛋白 的苦味问题,是其在食品中扩展应用的主要障碍。 酶解蛋白的苦味与蛋白中的疏水氨基酸有 关[1 ,在水解过程中,疏水氨基酸暴露出来,与舌上 的味蕾接触,就会呈现苦味。蛋白中的疏水氨基酸 含量越高,苦味越大[ts,tg?。Izawa等[20_人对酪蛋白 和大豆蛋白的水解物用豚鼠气单胞菌(Aeromonas caviae)T一64生产的氨肽酶进行水解,自由氨基酸 比例增加,苦味大幅度增加,对这些水解产生的氨基 酸进行分析,76%以上都是疏水氨基酸,从而证明苦 味主要是由肽链末端的疏水氨基酸引起的。 相对而言,氨基酸导致的苦味远小于多肽,研究 表明,苦味主要由分子量在6 000以下的多肽引起 的。Cho等[1 对市场上的多种酶解大豆分离蛋白产 品进行分析,研究表明,苦味的大小取决于蛋白的水 解度,苦味主要由1 000 ̄4 000分子量范围的多肽产 生的,分子量低于1 000的多肽组分苦味相对较小。 对酶解蛋白的脱苦,目前主要有4种途径:①类 Vo1.13,2006,No.5 蛋白反应。该反应是指在一定条件下,用蛋白酶催 化蛋白质水解物或低聚肽混合物的反应,生成一种 不溶于水的弹性胶状蛋白类物质;②遮掩。不同研 究者证实苹果酸、柠檬酸等一些有机酸、环状糊精、 麦芽糊精、淀粉、果胶都有不同程度的脱苦效果;③ 选择性分离。苦味肽相对于其他多肽成分,含有较 高的疏水基团,利用这种特性可以对苦味肽进行选 择性分离。所采用的手段包括:吸附剂吸附、有机溶 剂萃取、等电点沉淀、色谱分离等。目前工业上,主 要采用活性炭吸附法,这种方法虽对苦味具有很大 的改善功效,但也会大幅度降低酶解蛋白的得率,因 此,一般也只是在一些高增值产品中使用;④通过酶 的选择,特别是用一些外切肽酶对酶解蛋白进行处 理。研究证明,外切酶对于减弱苦味具有良好的效 果口 ;另外,也有一些研究表明,真菌蛋白酶的水 解产物苦味较小,原因可能在于真菌蛋白中含有一 些肽酶的作用。微生物蛋白酶中,酸性蛋白酶产生 的水解物苦味相对较小,碱性蛋白酶苦味相对较大。 目前,外切酶的脱苦方法最为常用,但该方法如使用 不当会造成产品中氨基酸比例过高,因此,使用时需 要对水解度进行控制。 3结论与展望 总之,随着酶技术的进一步发展和新型酶制剂 种类的出现,关于酶制剂在大豆加工领域中的应用 问题会逐步得以解决,使大豆蛋白质加工领域在深 度和广度上得到提升,从而推动食品业的发展。 参考文献 [1]S.J ung,B.P.Lamsa1.Functionality of soy protein pro— duced by enzyme-assisted extraction[J].J.AOCS, 2006,83(1):71—78. [2]Jun Junfeng,Masayoshi Saito,Zhang Yanyan,et a1.Gel— forming ability and radical—scavenging activity of soy protein hydrolysate treated with transglutaminase[J].J. Food Sci.,2005,70(7):87—92. [3]陈志雄.利用酵素水解法生产黄豆多肽之研究[D].台 湾:东海大学,2000. E43 E.A.Pena—Ramos,Y.L.Xiong.Antioxidant activity of soy protein hydrolysates in a liposomal system[J].J. Food Sci.2002,67(8):2952—2956. E53张国胜,孔繁东,祖国仁,等.大豆蛋白抗高血压活性肽 的研究[J].中国乳品工业,2004,32(8):12—14. (下转第24页) 2] 维普资讯 http://www.cqvip.com
食品科技 白速逸等:颗粒冷水溶胀淀粉在微波食品中的应用 水溶胀淀粉对改善面糊的黏度和提高水分含量起着 的硬挺性和手感;在石油、建筑行业中,颗粒冷水溶 胀淀粉的快速溶于冷水形成高黏度淀粉糊及耐加工 重要的作用,该淀粉溶于水后形成黏度而增稠,能够 包裹更多的空气泡,增大蛋糕的比体积,使其结构更 加松软。 等特性,可用做石油钻探泥浆的保水剂,以及建筑工 业中的水质涂料等 ]。 综上所述,颗粒冷水溶胀淀粉作为一种新产品、 一4其他应用及展望 颗粒冷水溶胀淀粉除应用于食品工业外,还广 泛应用于医药、化妆品、化工、纺织、石油钻探等行业 中 。 种新型的淀粉衍生物,有着广阔的市场发展前景, 将会产生显著的经济效益和社会效益。因此,颗粒 冷水溶胀淀粉的生产及应用必将形成一个新的投资 热点。 参考文献 在医药行业中,新型西药片由药用成分、颗粒冷 水溶胀淀粉、润滑剂等组成,其中颗粒冷水溶胀淀粉 除了起物质平衡作用外,还起粘合剂作用,这样就减 [1]尤 新.玉米深加工技术[M].北京:中国轻工业出版 社,2004:9—18. 少了使用其他粘合剂所引起的副作用。同时,它还 具有成形后强度高,服用后易消化、易崩解等特点; 在化妆品行业中,爽身粉是一种常见的护肤粉,近年 F2]张燕萍.变性淀粉制造与应用FM].北京:精细化工出版 社,2001. 来,国外用颗粒冷水溶胀淀粉代替滑石粉和淀粉制 造出新型爽身粉,这种爽身粉不但具备普通爽身粉 f3]宫慧慧,高群玉,陈惠音.颗粒状冷水可溶性淀粉研究进 展[J].粮食与饲料工业,2003(1):41—43. F4]刘亚伟.淀粉生产及其深加工技术FM].北京:中国轻工 业出版社,2001:308—310. 的特点,还具有与皮肤亲合性好、吸水性强等优点; 在纺织工业中,由于颗粒冷水溶胀淀粉具有很好的 黏接性,可用做各种纤维的经纱上浆剂,以增加浆纱 [5]谢碧霞,钟秋平,谢涛,等.淀粉的特性与应用研究现状 及发展对策[J].经济林研究,2004,22(4):61—64,90. [6]侯汉学,董海洲,刘传富,等.我国变性淀粉的应用现状 及发展趋势[J].粮食与饲料工业,2001(2):44—46. 强度,提高纤维的织造性能。此外,还用于纺织成品 精整加工的浆料,由于其渗透性较强,可以增加织物 (上接第21页) [6]吴建中,欧仕益,唐书泽,等.大豆蛋白的酶水解产物研 究[J].中国油脂,2004,29(8):50—53. [7]刘文辉.大豆分离蛋白酶法水解制备多肽及应用的研究 [D].北京;华北农业大学,2003. [8]李雄辉,过新胜,徐刚.大豆多肽提取工艺的研究FJ]. 食品科学,1999,20(9):28—3O. 124—125. [15]Y.F.Wu,H.H.Back,P.D.Gerard,et a1.Development of a meat—‘like process flavoring from soybean——based en—— zyme-hydrolyzed vegetable protein(E—HVP)[J].J. Food Sci.,2000,65(7):1220—1227. [161 M.D.Aaslyng.The influence of maturation on flavor and chemical composition of hydrolyzed soy protein pro— [9]张玲华,唐小俊,张宝玲.大豆多肽制备工艺的研究FJ]. 食品与发酵工业,2001,27(3):37—39. duced by acidic and enzymatic hydrolysis[J].Z.Leb— ensm Unters Forsch A.,1999,208:355—361. [1O]刘通讯,朱小乔,杨晓泉.多酶协同作用生产大豆多肽 的研究FJ].食品科学,2002,23(11):29—32. [11]武彦文,欧阳杰.水解植物蛋白(HVP)的酶法制备及 [1 7]Hirofumi Motoi,Shiniehi Fukudome,Itaru Urabe.Con— tinuous production of wheat gluten peptide with foaming properties using immobilized enzymes[J].Eur.Food Res.Techno1,2004,219:522—528. 应用[J].中国调味品,2002(5);19—21,45. [12]Tony Byun,Kofod L,Blinkovsky A.Synergistic action of an X ‘prolyl dipeptid aminopeptidase and a non——specific [1 8]Matoba T,Hata T.Relationship between bitterness of peptides and their chemical structures[J].Agric.Bio1. Chem.,1972,37(8):1423—1431. aminopeptidase in protein hydrolysisVJ].J.Agric.Food Chem.,2001,49(4):2061—2063. [19]Myong J.Cho,Nan Unklesbay,Fu—Hung Hsieh,et a1.Hy— drophobicity of bitter peptides from soy protein hydrolysates [13]M.D.Aaslyng,Larsen,L.M.Nielsen.Development of chemical and sensory characteristics during enzymatic [J].J.Agrie.Food Chem.,2004.52:5895—5901. [20]Noboru Izawa,Ken Tokuyasu,Kiyoshi H ayashi.Debit tering of protein hydrolysates using aeromonas caviae hydrolysis of soy[J].Food Research and Technology, 1999,208:50—56. [1 4]Robert J,Whitehurst Barry A.Enzymes in food tech— aminopeptidase[J].J.Agric.Food Chem.,1997.45 (3):543—545. nology[M].Sheffield:Sheffield Academic Pre.ss,2002: 24
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