服用定坤丹时的禁忌有如下这些。1.不能食用生冷油腻及刺激性食物;2.伤风感冒时停服;3.孕妇禁用;4、定坤丹含马兜铃科植物细辛，因此要在医生指导下服药，且要定期复查肾功能。定坤丹是否有副作用现在尚未明确。
定坤丹时有多种中药制成的中成药，不像西药那样副作用很大，不良反应很多。通过如下的实验更加能够体现出定坤丹的这种优点。
采用雌性激素对性器官增重法，选用雌性幼大鼠，分成给药组及对照组。定坤丹组以每公斤体重6000mg灌胃给药，空白对照组以赋形剂蜂蜜同体积(1ml)灌胃，阳性对照组以乙烯雌酚为参考标准，每只大鼠注射4mg，以0.2ml植物油溶解，隔日注射，共5次(10日)。停药后，第3日剖检，以各组动物子宫卵巢重量/100g体重，进行组间对比。
定坤丹组子宫卵巢重量为161(mg/100g体重)，空白对照组为131，已烯雌酚组为254，组间有非常显著的差异。证实定坤丹确有雌性激素样活性。
镜检证实，能使大鼠子宫内膜增厚，细胞呈双层均匀排列。腺胞较多，体积比较大，距子宫内膜近，呈现腺体分泌状态。卵巢有初级、次级及成熟卵胞，按次序健壮发育。这为定坤丹治疗月经不调，性器官发育不良及不孕症等，提供了药理学依据。由此可以证明定坤丹的作用，并且不会像已烯雌酚那样强烈。从而说明中药复方的作用，有其缓和持久的突出优点。